Вопросы. Что лучше сдавать ПЦР или ИФА
И ИФА (иммуноферментный анализ)
являются одними из самых современных и точных методов диагностики инфекционных болезней в лабораторных условиях.
Каждый из этих методов позволяет оценить проблему с разных сторон, а их информативность зависит от вида . Таким образом, определять, какой из них лучше, возможно в конкретных случаях (при конкретных заболеваниях
). Порой, для оценки болезни в целом необходимо применять оба метода.
ПЦР (полимеразная цепная реакция).
Это самый достоверный метод определения инфекционного или вирусного агента в организме больного или в отдельном органе. При помощи ПЦР можно определить ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту ), другими словами - генетический код любого микроорганизма или с последующей его идентификацией.Основные преимущества ПЦР:
- высокая специфичность;
- повышенная чувствительность;
- позволяет определить возбудителя инфекции;
- позволяет сделать количественный анализ (определить количество вирусов, микробов в организме );
- возможность диагностировать одновременно несколько возбудителей;
- возможность контролировать эффективность медикаментозного лечения;
- быстрота (получение результатов в течение суток ).
ИФА (иммуноферментный анализ).
Это иммунологический метод лабораторной диагностики , который позволяет выявить не самого возбудителя, а патологические изменения в организме, вызванные работой иммунной системы. Иммунная система человека вырабатывает специальные антитела в ответ на агрессию со стороны вирусов, бактерий , грибков и простейших.В качестве этих антител выступают белки – иммуноглобулины трех классов:
- иммуноглобулины M;
- иммуноглобулины A;
- иммуноглобулины G.
Выявление этих иммуноглобулинов методом ИФА помогает определить точную стадию инфекционного процесса и проследить его динамику. С помощью данного метода выявляется ВИЧ -инфекция и ее стадия.
Разница между ПЦР и ИФА:
- ПЦР анализ позволяет определить микроорганизм, который вызвал инфекцию. ИФА определяет только наличие контакта организма с инфекцией.
- ПРЦ определяет присутствие возбудителя в тех органах и тканях, которые были взяты на анализ. Таким образом, ПЦР указывает на поражение конкретного органа. ИФА метод позволяет определить распространенность инфекции по всему организму.
- При ПЦР материалом для диагностики служат ткани и жидкости организма, в которых могут быть возбудители. Для ИФА нет разницы, какой материал будет исследоваться, потому что иммуноглобулины циркулируют во всем организме.
высокая чувствительность;
Зависит от цели, которая ставится при обследовании.
ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это высокочувствительный метод определения возбудителя бактериальной или вирусной инфекции в организме. Он основан на определении специфической структуры ДНК (генетического кода) каждого микроба или вируса. Вирусные инфекции можно обнаруживать сразу после заражения, за недели или месяцы до того, как проявятся первые симптомы. Метод ПЦР незаменим для выявления латентных (скрытых) и хронических инфекций. Эта особенность позволяет обнаружить бактерии и вирусы, патогенные человеку, которые невозможно увидеть в мазке или определить методом ИФА. Кроме того, с его помощью можно определить количество копий возбудителя (количественный и полуколичественный ПЦР анализ), что очень важно при наблюдении в процессе лечения, так как это позволяет оценить качество терапии.
Основные особенности и достоинства метода ПЦР:
100% специфичность, т.к. каждый возбудитель имеет уникальный фрагмент нуклеиновых кислот;
высокая чувствительность;
возможность определить количество копий возбудителя (позволяет оценить качество терапии);
возможность одновременной диагностики нескольких возбудителей;
быстрота получения результата и полная автоматизация.
Иммуноферментный анализ, или ИФА – это лабораторный иммунологический метод качественного определения и количественного измерения антител к различным возбудителям инфекций, неспецифических (универсальных) иммуноглобулинов, количественного измерения гормонов.
Метод ИФА обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая в настоящее время составляет более 90% и позволяет определить реакцию организма пациента на инфекционный процесс.
Тест-системы для иммуноферментной диагностики выявляют широкий круг различных инфекций: ВИЧ-инфекция, вирусные гепатиты, цитомегаловирусная, герпетическая, токсоплазменная и др. инфекции.
Для диагностики инфекционных заболеваний, в том числе передающихся половым путем, используются три класса иммуноглобулинов: M, A, G.
Благодаря тому, что иммуноглобулины разных классов вырабатываются в определенной последовательности, с помощью ИФА можно диагностировать инфекцию на разных стадиях, и отслеживать динамику развития процесса.
Последовательность выработки иммуноглобулинов (Ig) разных классов следующая:
Первыми появляются IgM-антитела. Как правило, это происходит через 1–3 недели с момента заражения. Время обнаружения антител зависит как от самой инфекции, так и от особенностей иммунной системы конкретного человека. Появляются симптомы острой инфекции. Обнаружение IgM-антител в анализе указывает на наличие острой фазы заболевания или на обострение хронических инфекционных заболеваний.
Через месяц начинают вырабатываться IgA-антитела, основная часть которых концентрируется на слизистых оболочках, где реализуется их защитная функция.
Последними появляются IgG-антитела, как правило, на 4-й неделе с момента заражения. После лечения хламидиоза, микоплазмоза, трихомониаза их уровень значительно снижается, так как иммунитет против этих заболеваний не развивается.
Следует обратить внимание на то, что обнаружение иммуноглобулинов (IgM, IgА, IgG) указывает только на наличие антител, а не на наличие возбудителя. Поэтому в некоторых случаях иммуноферментный анализ может давать и ложные результаты – как ложноположительные, так и ложноотрицательные. Однако специфичность лучших тест-систем ИФА в настоящее время приближается к 100%.
Достоинства ИФА - возможность диагностики через 1-3 недели после контакта с возбудителем инфекции, возможность прослеживать динамику развития процесса, быстрота и удобство в работе.
ИФА - относясь к непрямым методам диагностики, он позволяет определить иммунный ответ организма на возбудителя, а не сам возбудитель.
Определить, какой лучше сдать анализ для диагностики, в каждой конкретной ситуации может только врач, назначающий обследование. Для комплексной оценки инфекции, в некоторых случаях, может потребоваться как выявление самого возбудителя (ПЦР), так и определение антител к нему в организме пациента (ИФА), с последующим контролем после проведенного лечения.
Новости партнеров:
Вконтакте
Одноклассники
НПЦР и ИФА-диагностика - в чем разница?
Как и анализ ПЦР, ИФА-методы широко применяются в современной лабораторной диагностике ИППП . При чем врач может назначить Вам не только сдать ПЦР анализ, но и провести ИФА - диагностику для выявления определенной инфекции. С непрофессиональной точки зрения пациента подобный комплекс исследования вызывает много вопросов, поскольку все лабораторные методы исследования на первый взгляд кажутся абсолютно одинаковыми. Но, несмотря на внешнюю схожесть, разница между ПЦР, ИФА и другими иммунологическими исследованиями все же есть.
ИФА-анализ основан на выявлении не самой инфекции, а ее продуктов жизнедеятельности - белов-маркеров. ПЦР-анализ напротив выявляет существующие в настоящее время инфекционные агенты (бактерии, вирусы, грибы).
РИФ , как и другие иммунологические методы исследования, тоже несколько уступает достоверности ПЦР-инфекции. Суть РИФ такова, при проведении анализа антигены возбудителя (молекулы белка, свойственные инфекции) ищут антителами к ним. Если антитело «обнаружит» белок, антиген инфекции, значит потенциально человек инфицирован. Однако свойство антитела таково, что они могут реагировать не с одним, а с разными антигенами - так называемые перекрестно-реагирующие антигены. Из-за этого специфичность (способность метода выявлять лишь тот инфекционный агент, для которого данный метод исследования назначен) у РИФ чуть ниже, чем у ПЦР.
Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать. Обычно это происходит вследствие нескольких причин:
- «Иммунологический след» - «след» от уже перенесенной инфекции . В ответ на внедрение инфекции организм начинает вырабатывать антитела, в частности,антитела класса IgG . Эти антитела «улавливает» ИФА-анализ. Метод ПЦР реагирует только на наличие молекул ДНК инфекции в организме. В такой ситуации ПЦР-анализ дает отрицательный результат, а ИФА - положительный. При чем в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.
- Разница в оборудовании для проведения диагностики . Получение положительного результата ИФА и ПЦР - отрицательного, может быть вызвано использованием особых тест-систем в ИФА-анализе, которые выявляют все виды бактерий, в том числе те, которые в определенном количеств в норме содержатся в организме человека. Тест-система , используемая в ПЦР-анализе, может быть основана только на определение особого вида болезнетворных бактерий. Например, тест-система для ИФА-диагностики настроена на выявление всех видов хламидий: С. Pneumonia, C. Pecorum, C. Psitaci. А в проведении ПЦР-анализа может быть использована тест-система, выявляющая только С. Trachomatis . Вот почему, ИФА-анализ на С. Pneumonia будет положительным, а ПЦР - отрицательным.
- Разница в используемом материале . Материал для ПЦР получают из места предполагаемой локализации инфекции. Для ИФА-диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат - ПЦР-диагностика дает отрицательный, а ИФА - положительный результат. Например, хламидии могут локализироваться в разных местах организма. Вызвав хронический сальпингит, проведенный в области шейки матки анализ ПЦР хламидии не обнаружит. Но ИФА-диагностика все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс.
- Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР-диагностики. При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА - отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции. Подобное может наблюдать врач-лаборант в том случае, если инфекция «свежая», т. е. даже при наличии определенных симптомов уровень антител класса IgG в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. Для половых инфекций подобный период «молчания» ИФА-диагностики может достигать двух недель.
Подводя итоги, можно сказать, что и ИФА, и ПЦР-анализы сами по себе не являются панацеей в диагностике инфекций. Нельзя одной ПЦР или ИФА-диагностикой заменить все существующие методы исследования, ими можно лишь дополнить их, позволив всем методам достигнуть реальных, точных, достоверных результатов.
Такие новейшие методы диагностики инфекционных и иммунных заболеваний как ИФА и ПЦР , основанные на последних достижениях молекулярной биологии, в настоящее время быстро вошли в медицинскую практику и, тем самым значительно подняли общий уровень диагностики в целом.
В собственной современной лаборатории медицинского центра «СОЛО» существуют и активно используются оба эти метода диагностики.
Теперь, чтобы выявить у себя скрытые половые заболевания или убедиться в собственном здоровье, достаточно сдать несложные анализы – кровь или соскоб ткани с половых путей на ИФА- и ПЦР–диагностику. Ответ будет известен в кратчайшие сроки, причем по точности эти лабораторные исследования близки к 100%.
Как ИФА (иммуноферментный анализ) так и ПЦР (полимеразная цепная реакция) являются современными достоверными методам лабораторной диагностики половых инфекций (ЗППП). Однако они позволяют оценить ситуацию с разных сторон.
Как и анализ ПЦР, так и ИФА-метод широко применяются в современной лабораторной диагностике ИППП. Причем врач может назначить Вам сдать не только ПЦР анализ, но и провести ИФА - диагностику для выявления определенной инфекции. С точки зрения пациента, подобный комплекс исследования вызывает много вопросов, поскольку все лабораторные анализы на первый взгляд кажутся абсолютно одинаковыми. Но, несмотря на внешнюю схожесть, разница между ПЦР, ИФА и другими иммунологическими исследованиями все же есть! Поэтому спорить и негодовать по поводу одинаковых анализов не стоит.
Диагностика по методу иммуноферментного анализа (или ИФА) выявляет не саму болезнь, а «следы», которые она оставляет в организме – специфические белки-антитела, которые вырабатываются собственной иммунной системой человека в ответ на атаку вирусов или бактерий. Иногда анализ ИФА дает положительный результат анализа у человека, переболевшего инфекционной болезнью в прошлом и уже не нуждающегося в лечении в настоящем. Это случается оттого, что иммунная система долгое время сохраняет «память» о перенесенных болезнях, а на некоторые из них даже на протяжении всей оставшейся жизни человека. Напротив, результат анализа ИФА изредка может получиться ложноотрицательным, если с момента заражения прошло еще недостаточно времени, и организм не успел среагировать на инфекцию выделением специфических белков-маркеров. Эти факторы следует учитывать при интерпретации результатов, поэтому в сомнительных случая результаты ИФА-анализа перепроверяют, и для этого необходимо сдать анализ ПЦР.
Диагностика по методу полимеразных цепных реакций (или анализ ПЦР) позволяет с высочайшей точностью выявить не только возбудителя болезни (бактерию, вирус), но и малейший фрагмент его ДНК, который является неповторимым для каждой формы жизни. Поэтому ПЦР иногда называют ДНК-диагностикой, а специфичность анализа ПЦР, по некоторым технологиям достигает 100% точности, причем он способен выявлять даже вялотекущие и хронические инфекции, не поддающиеся диагностике по ИФА.
ПЦР анализ дает возможность не только определить какой тип инфекции есть в организме, но и дает количественную оценку инфекции, то есть показывает, как много микробов есть в организме человека.
Количественный анализ ПЦР является очень важным в диагностике и в оценке эффективности лечения многих хронических инфекций (например, вирусного гепатита C).
 |
Метод ПЦР позволяет:
|
Но, несмотря на все достоинства ПЦР, преимущественное его использование для выявления инфекционного возбудителя применимо не ко всем микроорганизмам.
Так, например, для таких возбудителей как стафилококк или стрептококк лучше использовать микробиологический метод, а для диагностики бруцеллеза, бореллиоза, токсоплазмоза, краснухи, кори – целесообразнее использовать ИФА-метод.
Следует учитывать, что данные ПЦР-исследования распространяются лишь на орган (ткань), клеточный материал которого (мазок-соскоб) забирается на исследование. Это вносит известные ограничения, не позволяющие в ряде случаев судить о распространенности процесса. Например, выявление хламидий в канале шейки матки не позволяет утверждать присутствие хламидий в маточных трубах, ткани яичников, суставах, легких и иных органах и тканях.
Метод ПЦР отличается высокой информативностью и достоверностью относительно инфицирования (заражения) конкретного органа (участка ткани), а метод ИФА показывает распространенность процесса и возможную вовлеченность в инфекционный процесс органов и тканей, недоступных для прямой диагностики.
Таким образом, ИФА-метод основан на выявлении не самой инфекции, а ее продуктов жизнедеятельности - белков-маркеров. ПЦР-анализ, напротив, выявляет существующие в настоящее время инфекционные агенты (бактерии, вирусы, грибы).
Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать. Обычно это происходит вследствие нескольких причин:
«Иммунологический след» - «след» от уже перенесенной инфекции.
В ответ на внедрение инфекции организм начинает вырабатывать антитела, в частности, антитела класса IgG. Эти антитела «улавливает» ИФА-анализ. Метод ПЦР реагирует только на наличие молекул ДНК инфекции в организме. В такой ситуации ПЦР-анализ дает отрицательный результат, а ИФА - положительный. Причем в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы положительный результат ИФА-диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления.
Разница в оборудовании для проведения диагностики.
Получение положительного результата ИФА и отрицательного ПЦР может быть вызвано использованием особых тест-систем в ИФА-анализе, которые выявляют все виды бактерий, в том числе те, которые в определенном количеств в норме содержатся в организме человека. Тест-система, используемая в ПЦР-анализе, может быть основана только на определение особого вида болезнетворных бактерий. Например, тест-система для ИФА-диагностики настроена на выявление всех видов хламидий: С. Pneumonia, C. Pecorum, C. Psitaci. А в проведении ПЦР-анализа может быть использована тест-система, выявляющая только С. Trachomatis. Вот почему ИФА-анализ на С. Pneumonia будет положительным, а ПЦР - отрицательным.
Разница в используемом материале.
Материал для ПЦР получают из места предполагаемой локализации инфекции. Для ИФА-диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат - ПЦР-диагностика дает отрицательный, а ИФА - положительный результат. Например, хламидии могут локализироваться в разных местах организма. При хроническом сальпингите проведенный в области шейки матки анализ ПЦР хламидии не обнаружит. Но ИФА-диагностика все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс.
Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР-диагностики.
При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА - отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции.
Подобное может наблюдать врач-лаборант в том случае, если инфекция «свежая», т. е. даже при наличии определенных симптомов уровень антител класса IgG в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. Для половых инфекций подобный период «молчания» ИФА-диагностики может достигать двух недель.
Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем, требует комплексной (совокупной) оценки данных диагностических методов.
Методы ИФА и ПЦР взаимно дополняют друг друга. В рутинной (повседневной) практике применяются оба метода исследования для быстрой и достоверной диагностики.
И помните: положительный ответ любого современного лабораторного исследования – это повод не для паники, а для визита к врачу!
В лабораторной диагностике существует множество методов выявления необходимого элемента в биоматериале. Для диагностики инфекционных заболеваний чаще всего используют два принципиально разных метода: ИФА и ПЦР . Мы предлагаем Вам ознакомиться с данными методами, чтоб понять плюсы и минусы каждого из них.
ПЦР – один из самых наукоемких методов. Он обнаруживает ДНК микроорганизма. Генетический материал индивидуален для любого микроба, а это значит, что метод обладает самой высокой специфичностью и не может «обознаться». Принцип ПЦР заключается в том, что в пробирке происходит многократное удвоение искомого генетического кода. В случае присутствия даже незначительного количества этого кода, произойдет увеличение его количества, и анализатор сможет «уловить» его наличие. Таким образом, ПЦР – «золотой стандарт» выявления инфекционных агентов. Однако, у этого метода есть и свои минусы. Во-первых, в отличие от ИФА, ПЦР может сказать о наличии возбудителя только в месте взятия биоматериала, которое ограничено мазком (например, с уретры или из носа). Во-вторых, за счет своей высокой чувствительности, ПЦР может обнаружить даже мертвые частицы микробов, что наблюдается сразу после лечения. В таком случае, результат будет ложноположительный.
Резюмируя вышесказанное, приведем таблицу сравнения этих двух методов друг с другом:
|
Характеристика метода |
||
| Биоматериал | Мазок / кровь | Кровь |
|
Цена |
||
|
Чувствительность |
||
|
Специфичность |
||
|
Срок выполнения |
||
|
«Человеческий фактор» |
Отсутствует |
Отсутствует |
|
Подготовка к сдаче анализа |
Требуется |
Не требуется |
|
Локализация возбудителя в организме |
Только в месте взятия биоматериала |
Роли не играет |
|
Возможность определения стадии инфекционного процесса |
||
|
Отмена антибиотикотерапии при выполнении анализа |
||
|
Выявление возбудителя на ранней стадии |
Внимание! Данные «классические» методы диагностики в КДЛ «ОЛИМП» модифицированы: ПЦР выполняется в Real-time режиме, вместо ИФА используют ЭХЛ, что повышает качество исследований и сводит к минимуму вероятность ложных результатов.
